Arnica des montagnes - hydrogel nanocomposite, rhinite allergique (J Mater Sci Mater Med 2025)

Hydrogel nanocomposite incorporant un extrait d’Arnica montana, des nanoparticules de chitosane chargées en propolis et des cellules souches mésenchymateuses dérivées du sang menstruel pour le traitement de la rhinite allergique

Référence : Journal of Materials Science. Materials in Medicine 2025. — PMC12518367 · DOI 10.1007/s10856-025-06939-7 Type : étude préclinique in vitro et in vivo · Plante : Arnica des montagnes · Propriété → Peau Accès : ⭐ libre (open access) → texte intégral traduit. Fidélité : traduction intégrale et fidèle du texte des auteurs. Appels [n] omis ; figures/tableaux « [ ] ».

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Résumé

La rhinite allergique (RA) est une affection inflammatoire courante qui nécessite des approches thérapeutiques innovantes. Cette étude présente un système d’hydrogel nanocomposite associant un extrait d’Arnica montana et des nanoparticules de chitosane chargées en propolis (AMEPROCNPs) à des cellules souches mésenchymateuses dérivées du sang menstruel (MenSCs), conçu pour assurer une libération prolongée et améliorer la cicatrisation de la muqueuse. Le système a démontré une biocompatibilité, une libération efficace des médicaments et une forte mucoadhésion. Les études in vitro ont montré des diminutions marquées des cytokines pro-inflammatoires, notamment l’IL-6, l’IL-1β et le TNF-α, ainsi qu’une cytoprotection significative contre le stress oxydatif. In vivo, la formulation optimisée (HYDROMenSC-CNP-8) a considérablement atténué les symptômes de la RA et significativement diminué l’expression des principales cytokines associées aux Th2 (IL-4, IL-5, IL-13) et du TNF-α, tout en augmentant les taux d’IFN-γ, avec des effets comparables à ceux du propionate de fluticasone. Ces résultats suggèrent que l’hydrogel de collagène contenant des MenSCs et chargé en AMEPROCNPs constitue une solution de remplacement prometteuse, sûre et efficace aux traitements actuels de la RA. En outre, ce système pourrait être appliqué plus largement au traitement d’autres maladies inflammatoires et allergiques.

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Introduction

La rhinite allergique (RA) est une inflammation chronique de la muqueuse nasale caractérisée par des symptômes tels que les éternuements, la congestion nasale, les démangeaisons et la rhinorrhée déclenchés par des allergènes. Les traitements conventionnels tels que les antihistaminiques, les corticostéroïdes intranasaux et l’immunothérapie allergénique présentent souvent des effets indésirables ou une efficacité limitée, ce qui incite à explorer d’autres traitements. Les produits naturels, avec leurs composés bioactifs et leur risque d’effets indésirables inférieur à celui des médicaments de synthèse, offrent des bénéfices potentiels. L’extrait d’Arnica montana et la propolis sont reconnus pour leurs propriétés anti-inflammatoires, antioxydantes et immunomodulatrices, ce qui en fait des candidats prometteurs pour le traitement de la RA. Arnica montana, plante herbacée vivace originaire d’Europe, est traditionnellement utilisée pour ses effets anti-inflammatoires et antalgiques. Ses composés bioactifs — flavonoïdes, lactones sesquiterpéniques (telles que l’hélénaline) et acides phénoliques — modulent les réponses immunitaires en inhibant les cytokines pro-inflammatoires et la libération d’histamine, ce qui laisse entrevoir un potentiel pour atténuer les symptômes de la RA. La propolis, récoltée par les abeilles, est appréciée en médecine traditionnelle pour ses propriétés antimicrobiennes, anti-inflammatoires et antioxydantes attribuées aux polyphénols, flavonoïdes, terpènes et acides phénoliques. Elle inhibe les enzymes intervenant dans la production de médiateurs inflammatoires et régule les cytokines, ce qui pourrait réduire l’inflammation nasale chez les patients atteints de RA. L’incorporation de ces agents bioactifs dans un système d’administration de médicaments à libération prolongée pourrait améliorer leur efficacité thérapeutique. À cette fin, nous avons utilisé des nanoparticules de chitosane (CNPs) comme vecteur d’administration. Les CNPs offrent une libération prolongée et une meilleure pénétration à travers les barrières muqueuses, ce qui convient parfaitement à l’administration d’extrait d’Arnica montana et de propolis dans les tissus nasaux. Outre les produits naturels, les thérapies à base de cellules souches se sont révélées efficaces dans la prise en charge des réactions allergiques. Les cellules souches mésenchymateuses dérivées du sang menstruel (MenSCs), dotées d’importantes propriétés régénératrices et immunomodulatrices, sont étudiées en médecine régénérative. L’intégration de MenSCs dans des formulations d’hydrogel de collagène vise à renforcer les mécanismes de réparation tissulaire de la muqueuse nasale affectée par la RA. Le collagène, composant essentiel de la matrice extracellulaire, favorise la régénération tissulaire et sert de matrice de soutien dans les hydrogels. L’hydrogel de collagène améliore la rétention et l’efficacité, dans la muqueuse nasale, des nanoparticules chargées en extrait d’Arnica montana et en propolis, en fournissant une plateforme de libération prolongée. En résumé, l’association de CNPs chargées en extrait d’Arnica montana et en propolis dans un hydrogel de collagène contenant des MenSCs constitue une approche innovante du traitement de la RA. Cette stratégie met à profit les propriétés anti-inflammatoires et antioxydantes des produits naturels ainsi que le potentiel régénérateur des cellules souches afin d’atténuer les symptômes de la RA et, potentiellement, de modifier sa physiopathologie sous-jacente.

Le système d’hydrogel proposé, conçu pour le traitement de la rhinite allergique, serait administré par voie intranasale afin d’assurer un contact direct avec la muqueuse nasale. L’hydrogel, formulé pour se gélifier in situ à la température corporelle, serait administré au moyen d’un vaporisateur nasal ou d’un compte-gouttes afin d’en faciliter l’application. Après administration, l’hydrogel formerait dans la cavité nasale une matrice stable et mucoadhésive, permettant la libération prolongée de quercétine et de facteurs bioactifs provenant de cellules stromales dérivées du tissu adipeux (ASCs). Ce mode d’administration localisé maximiserait les effets thérapeutiques en réduisant les marqueurs inflammatoires et en favorisant la cicatrisation de la muqueuse, tout en limitant l’exposition systémique. L’optimisation de la viscosité et des propriétés de gélification assurerait le confort du patient et empêcherait l’écoulement nasal, faisant de ce système une approche thérapeutique pratique et adaptée aux patients pour la prise en charge des symptômes de la rhinite allergique.

Cette étude vise à évaluer l’efficacité antiallergique du système dans un modèle de rhinite allergique chez le rat, afin de mieux apprécier son potentiel thérapeutique.

Méthodes et matériaux

Préparation des nanoparticules de chitosane chargées en extrait d’Arnica montana et en propolis

Du chitosane (faible poids moléculaire, Sigma Aldrich, États-Unis) a été dissous pendant 6 h dans de l’acide acétique à 1 % v/v (glacial, Merck, Allemagne), à une concentration de 1 % en masse. Des extraits éthanoliques de propolis et d’Arnica montana (tous deux fournis par Barij Esans, Kashan, Iran) ont ensuite été associés à la solution de chitosane en volumes égaux (rapport 3:3:3) et mélangés pendant 4 h. La solution obtenue a ensuite été filtrée. Séparément, du tripolyphosphate (TPP, Sigma Aldrich, États-Unis) a été dissous pendant 4 h dans de l’eau distillée à une concentration de 0,25 % en masse, puis filtré. La solution de TPP a été ajoutée goutte à goutte à la solution de chitosane sous agitation, puis le mélange a été agité pendant 2 h supplémentaires. Enfin, le mélange a été centrifugé à 20 000 × g pendant 45 min. Le culot obtenu a été lyophilisé et conservé à 4 °C jusqu’à son utilisation ultérieure. Les nanovecteurs élaborés ont été dénommés AMEPROCNPs.

Préparation de l’hydrogel de collagène contenant les MenSCs et les AMEPROCNPs

Pour produire les hydrogels, 2 mL de collagène de type I (Sigma Aldrich, États-Unis) contenant 5 mg/mL de collagène ont été mélangés à 1 000 000 de MenSCs (troisième passage, ATCC) mises en suspension dans 2 mL de DMEM (Sigma Aldrich, États-Unis) supplémenté avec 10 % de FBS (Sigma Aldrich, États-Unis) et 1 % d’antibiotiques (Sigma Aldrich, États-Unis). Le nombre de MenSCs encapsulées dans 1 mL d’hydrogel de collagène était de 250 000 cellules. Trois concentrations différentes d’AMEPROCNPs, à savoir 2 % m/m, 4 % m/m et 8 % m/m, ont été ajoutées au mélange sur glace. Le sol a ensuite été placé dans l’incubateur pour permettre la gélification. Pour les applications in vivo, le sol a été injecté afin d’obtenir une gélification in situ. Les hydrogels contenant respectivement 2 % m/m, 4 % m/m et 8 % m/m d’AMEPROCNPs ont été dénommés HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8.

Études de la microstructure

La morphologie et la taille moyenne des particules des nanovecteurs élaborés ont été évaluées par microscopie électronique à balayage à émission de champ. En bref, les échantillons ont été séchés sur un ruban de carbone conducteur, puis revêtus d’une couche d’or de 10 nm à l’aide d’un métalliseur par pulvérisation cathodique pendant 250 s à 15–20 mA sous atmosphère d’argon. L’imagerie a été réalisée avec une tension d’accélération de 25 kV, une distance de travail de 8–12 mm et sous vide poussé (≤ 10⁻⁵ Pa). Le mode électrons secondaires (SE) a été utilisé pour l’imagerie à haute résolution, avec une taille de sonde de 3–5 nm et une plage de grossissement de 10 000×–50 000×.

Les échantillons d’hydrogel de collagène ont d’abord été fixés dans du formol tamponné neutre à 3,7 % (Merck, Allemagne) pendant 15 min, puis lavés trois fois dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS, pH 7,4), pendant 10 min à chaque fois. Les échantillons ont ensuite été traités, inclus dans la paraffine et coupés en sections de 5 µm d’épaisseur. Pour la corrélation histologique, les coupes tissulaires ont été colorées au trichrome de Masson et examinées en microscopie optique. L’expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Essai de viabilité cellulaire

La viabilité des MenSCs encapsulées dans les hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8 a été évaluée à l’aide du kit de dosage MTT (Sigma Aldrich, États-Unis). En bref, 100 µL de chaque hydrogel ont été déposés dans des puits individuels d’une plaque à 96 puits et cultivés pendant 5 jours dans du DMEM (Sigma Aldrich, États-Unis) supplémenté avec 10 % de FBS (Sigma Aldrich, États-Unis) et 1 % d’antibiotiques (Sigma Aldrich, États-Unis). Les plaques ont été maintenues dans un incubateur humidifié à 37 °C sous 5 % de CO₂. La viabilité cellulaire a été évaluée aux jours 1, 3 et 5 en ajoutant à chaque puits 100 µL de solution de MTT (5 mg/mL dans du PBS), puis en incubant pendant 4 h pour permettre la formation de cristaux de formazan. Après l’incubation, le milieu de culture a été soigneusement retiré et 100 µL de diméthylsulfoxyde (DMSO) ont été ajoutés pour dissoudre les cristaux de formazan. Les plaques ont été doucement agitées pendant 10 min afin d’assurer une solubilisation complète, puis l’absorbance a été mesurée à 570 nm au moyen d’un lecteur de microplaques. Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Essai de gonflement

Les caractéristiques de gonflement des hydrogels ont été évaluées selon une méthode décrite antérieurement. En bref, des hydrogels de masse connue (M0) ont été immergés dans un milieu complet et maintenus à 37 °C pendant 48 h. À différents moments, les hydrogels ont été retirés et leur masse a été mesurée (M1). La capacité de gonflement des hydrogels a ensuite été calculée à l’aide de l’équation suivante :

Gonflement (%) = ((M0 − M1) / M0) × 100

Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Essai de libération

La libération de la propolis et de l’extrait d’Arnica montana à partir des hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8 (sans MenSCs) a été évaluée par spectroscopie UV-visible. En bref, 400 mg de chaque hydrogel ont été placés dans 15 mL de PBS et maintenus à 37 °C pendant 7 jours. À différents moments, 0,5 mL du milieu de libération a été prélevé et sa densité optique a été mesurée à 323 nm pour la propolis et à 381 nm pour l’extrait d’Arnica montana, longueurs d’onde correspondant à leurs valeurs respectives de λmax. Un volume égal de PBS frais a ensuite été ajouté au milieu de libération. La libération cumulée des médicaments a été calculée à partir de ces mesures. Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Essai anti-inflammatoire

Dans cette expérience, les effets immunomodulateurs des hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8 sur la polarisation des macrophages et la sécrétion de cytokines ont été évalués. Un volume de 200 µL de chaque hydrogel a été déposé dans des puits individuels d’une plaque à 24 puits et laissé se stabiliser. La lignée de macrophages J774A.1 (ATCC) a ensuite été ensemencée sur les hydrogels à une densité de 30 000 cellules par cm² et cultivée pendant trois jours dans du DMEM (Sigma Aldrich, États-Unis) supplémenté avec 10 % de FBS (Sigma Aldrich, États-Unis) et 1 % de pénicilline-streptomycine (Sigma Aldrich, États-Unis), à 37 °C dans un incubateur humidifié sous 5 % de CO₂. Après la période de culture, les macrophages ont été stimulés pendant 12 h avec 1 μg/mL de lipopolysaccharide (LPS) ultrapure (Sigma Aldrich, États-Unis) afin d’induire une réponse pro-inflammatoire. Après la stimulation, les surnageants de culture cellulaire ont été recueillis et centrifugés à 1 000 × g pendant 5 min afin d’éliminer les débris. Les concentrations de cytokines pro-inflammatoires (TNF-α, IL-6 et IL-1β) dans les surnageants ont été quantifiées au moyen de kits ELISA disponibles dans le commerce (Abcam, États-Unis), conformément aux instructions du fabricant. En bref, 100 µL de chaque surnageant ou étalon ont été ajoutés à des plaques ELISA prérevêtues et incubés pendant la durée indiquée. Après lavage, les anticorps de détection ont été ajoutés, puis les anticorps secondaires conjugués à la peroxydase de raifort (HRP). Les plaques ont été révélées à l’aide d’un substrat de tétraméthylbenzidine (TMB), puis la réaction a été arrêtée avec de l’acide sulfurique 1 M. L’absorbance a été mesurée à 450 nm au moyen d’un lecteur de microplaques et les concentrations de cytokines ont été déterminées par interpolation à partir des courbes d’étalonnage. Toutes les expériences ont été réalisées en trois exemplaires.

Essai de cytoprotection

La viabilité des MenSCs cultivées avec des milieux conditionnés par les hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8 a été évaluée dans des conditions de stress oxydatif. En bref, 500 mg d’hydrogels ont été placés dans 4 mL de milieu complet et incubés pendant 7 jours. Le milieu a ensuite été recueilli et filtré. Pour l’essai de viabilité cellulaire, les MenSCs ont été ensemencées dans des plaques à 96 puits à raison de 7 500 cellules par puits et cultivées pendant 48 h avec un rapport volumique de 60:40 entre milieu frais et milieu conditionné par les hydrogels. Par la suite, 1 % v/v de H₂O₂ a été ajouté à chaque puits et les cellules ont été incubées pendant 1 h. La viabilité cellulaire a ensuite été évaluée à l’aide du kit de dosage MTT, conformément aux instructions du fabricant. Les cellules cultivées dans un milieu de culture non mélangé au milieu conditionné par l’hydrogel ont servi de témoins. Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Essai de piégeage des radicaux

La capacité de piégeage des radicaux des CNPs et des AMEPROCNPs a été évaluée par un essai DPPH selon une méthode décrite antérieurement. Les nanovecteurs ont été brièvement dispersés dans de l’eau désionisée à différentes dilutions. Une solution de DPPH à 0,1 mM a été préparée dans du méthanol. Chaque échantillon a fait l’objet de dilutions en série et a été mélangé à volume égal avec la solution de DPPH. Les mélanges ont ensuite été laissés à incuber dans l’obscurité pendant 1 h afin de permettre l’interaction avec les radicaux DPPH. Après la période d’incubation, l’absorbance de chaque échantillon a été lue à 517 nm. La capacité de piégeage des radicaux de chaque échantillon a ensuite été calculée selon une méthode établie antérieurement. Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Test de mucoadhésion

Le test in vitro de mucoadhésion des hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8 a été réalisé selon une procédure établie antérieurement. En résumé, 10 mg de chaque hydrogel ont été déposés sur une solution aqueuse d’agar à 1 % m/v et de mucine à 2 % m/v, placée sur une plaque de verre de 9 cm inclinée à 60° dans un incubateur à 37 °C. Le déplacement de l’hydrogel vers le bas a été enregistré en millimètres pendant une durée maximale de 6 h. Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Temps de gélification, analyse de la résistance du gel et mesure de la viscosité

La durée de gélification a été évaluée selon la technique de l’arrêt du barreau, décrite antérieurement. Un bécher de 20 mL a été placé sur un agitateur magnétique chauffant et 5 mL de solution de sol ont été versés dans le récipient. La solution a été agitée en continu à 30 tr/min et à 37 °C. Le temps a été relevé lorsque le barreau magnétique a cessé de bouger en raison de la gélification. La résistance du gel a été évaluée d’après le temps nécessaire à une masse pour pénétrer de 5 cm dans le gel. Les hydrogels ont été placés dans une éprouvette graduée et gélifiés à 37 °C. Une masse de 35 g a ensuite été placée sur la solution gélifiée et laissée s’enfoncer de 5 cm dans le gel. Le temps nécessaire à la masse pour pénétrer de 5 cm a été enregistré.

La viscosité des formulations d’hydrogel avec et sans nanovecteurs a été mesurée à l’aide d’un rhéomètre rotatif équipé d’une géométrie plan-plan. La température a été réglée à 37 °C afin de reproduire les conditions physiologiques et l’appareil a été étalonné conformément aux instructions du fabricant avant la mesure. Les échantillons d’hydrogel, préparés selon le protocole standard, ont été laissés à l’équilibre à 37 °C pendant 30 min avant les essais afin d’assurer leur homogénéité. Environ 2 mL de chaque hydrogel ont été soigneusement déposés à la spatule sur le plateau inférieur, puis le plateau supérieur a été abaissé jusqu’à obtenir un entrefer défini de 1 mm, en veillant à ne pas emprisonner de bulles d’air. L’excédent de matériau autour des bords a été soigneusement retiré. Afin d’évaluer le comportement rhéofluidifiant des hydrogels, un balayage du taux de cisaillement de 0,1 à 100 s⁻¹ a été effectué. La viscosité à chaque valeur du taux de cisaillement a été automatiquement enregistrée par le logiciel du rhéomètre. Chaque échantillon a été mesuré en trois exemplaires afin d’assurer la reproductibilité et de réduire au minimum l’erreur expérimentale. Les données de viscosité ont ensuite été représentées en fonction du taux de cisaillement afin d’examiner le comportement d’écoulement des hydrogels et de comparer les effets de différentes concentrations d’AMEPROCNPs sur le profil de viscosité. Chaque expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Essai de libération cellulaire

Afin d’évaluer la libération des cellules par les systèmes d’hydrogel, 1 mL de chaque formulation d’hydrogel a été déposé dans un puits individuel d’une plaque de culture à 6 puits. Ensuite, 3 mL de milieu de culture complet ont été ajoutés à chaque puits. Les plaques ont été incubées à 37 °C sous 5 % de CO₂ pendant 24 h afin de permettre une éventuelle migration des cellules depuis la matrice de l’hydrogel vers le milieu de culture environnant. Après la période d’incubation, les matrices d’hydrogel ont été soigneusement retirées des puits. Le nombre de cellules fixées à la surface de la plaque de culture tissulaire a été compté au microscope optique. L’efficacité de libération cellulaire a été calculée à l’aide de la formule suivante :

Efficacité de libération cellulaire (%) = (nombre de cellules libérées / nombre total de cellules encapsulées) × 100

L’expérience a été réalisée en trois exemplaires.

Étude in vivo

La recherche sur les animaux a reçu l’approbation du comité d’éthique de Jinan Zhike Medical Technology (no B217504). Des critères d’arrêt humanitaire ont été appliqués tout au long de l’étude afin de réduire au minimum la souffrance animale. Une anesthésie a été administrée avant toutes les procédures invasives et les animaux ont été surveillés quotidiennement afin de détecter tout signe de détresse ou toute réaction indésirable. Le nombre d’animaux utilisés (n = 5 par groupe) a été déterminé à partir d’une analyse de puissance afin de garantir la pertinence statistique tout en réduisant au minimum l’utilisation inutile d’animaux, conformément aux principes des 3R (remplacement, réduction et raffinement). L’euthanasie a été pratiquée au moyen d’un surdosage approuvé d’agent anesthésique afin d’assurer un terme indolore et éthique.

Un modèle de RA a été créé suivant un protocole décrit antérieurement. La méthode consistait à sensibiliser les animaux à l’ovalbumine. Une suspension allergénique préparée, contenant 1 mg d’ovalbumine et 50 mg d’hydroxyde d’aluminium [Al(OH)₃], a été injectée par voie intrapéritonéale à chaque souris, à raison de 1 mL tous les deux jours et de sept injections au total pour la phase initiale de sensibilisation. Du jour 15 au jour 21, une solution d’ovalbumine à 25 mg/mL a été administrée par voie intranasale dans chaque narine, une fois par jour pendant sept jours consécutifs.

Les animaux ont ensuite été répartis en huit groupes (5 animaux dans chaque groupe) :

• HYDROMenSC-CNP-2

• HYDROMenSC-CNP-4

• HYDROMenSC-CNP-8

• groupe HYDROMenSC (hydrogels sans AMEPROCNPs)

• HYDRO-CNP (hydrogels sans MenSCs)

• groupe HYDRO (hydrogels sans MenSCs ni AMEPROCNPs)

• groupe témoin positif traité avec une solution de propionate de fluticasone (Sigma Aldrich, États-Unis) dans une solution saline normale (50 µg par narine)

• groupe témoin négatif n’ayant reçu aucun traitement après l’induction de la RA.

À compter du jour 22 et pendant les 10 jours suivants, 30 µL de chaque hydrogel ont été introduits quotidiennement dans chaque narine de chaque rat. Après cette période de traitement, les animaux ont été euthanasiés sans cruauté et les tissus muqueux ont été prélevés pour des analyses ultérieures. Les tissus prélevés ont été fixés au formol, inclus dans la paraffine, coupés et colorés à l’hématoxyline-éosine (H&E) pour l’examen histologique.

Évaluation des symptômes de la RA

Le 10e jour après le traitement, les symptômes de la RA dans chaque groupe ont été évalués selon une méthode décrite antérieurement. En résumé, chaque rat a été placé dans une cage transparente séparée et, après une période d’acclimatation de 30 min, ses éternuements, ses grattements du nez et ses sécrétions nasales ont été observés pendant 10 min. Un score de 0 a été attribué en l’absence de grattement du nez ou d’éternuement, un score de 1 lorsque ces comportements survenaient 1 à 3 fois par minute, un score de 2 lorsqu’ils survenaient 4 à 6 fois par minute et un score de 3 lorsqu’ils survenaient plus de 6 fois par minute. Les sécrétions nasales ont été notées comme suit : 0 en l’absence de sécrétion, 1 en présence d’une sécrétion provenant d’une narine, 2 en présence d’une sécrétion provenant des deux narines et 3 en cas de volume débordant.

Dosage ELISA

Les concentrations d’IL-4, d’IL-5, d’IL-13, de TNF-α et d’IFN-γ dans la muqueuse nasale ont été quantifiées à l’aide de kits ELISA (Abcam, États-Unis), conformément aux instructions du fabricant. Les tissus de la muqueuse nasale ont d’abord été homogénéisés dans du PBS glacé (pH 7,4) contenant un mélange d’inhibiteurs de protéases, puis centrifugés à 10 000 × g pendant 15 min à 4 °C afin de recueillir le surnageant. La concentration totale en protéines a été déterminée à l’aide d’un kit de dosage des protéines BCA (Thermo Fisher Scientific, États-Unis) aux fins de normalisation. Pour la procédure ELISA, une plaque à 96 puits prérevêtue a été lavée trois fois avec du PBS contenant 0,05 % de Tween-20, puis saturée avec 1 % de BSA dans du PBS pendant 1 h à température ambiante. Des dilutions en série d’étalons de cytokines recombinantes (0–1 000 pg/mL) ont été préparées et 100 μL de chaque étalon ou échantillon ont été ajoutés à la plaque, puis incubés pendant 2 h à température ambiante. Après lavage, 100 μL d’anticorps de détection biotinylé ont été ajoutés et incubés pendant 1 h, puis une nouvelle étape de lavage a été suivie de l’ajout du conjugué streptavidine-HRP pendant 30 min dans l’obscurité. La réaction a été révélée avec le substrat TMB pendant 15–20 min, arrêtée avec de l’acide sulfurique 1 M, puis l’absorbance a été mesurée à 450 nm avec une longueur d’onde de référence de 570 nm. Les concentrations de cytokines ont été calculées en comparant les valeurs d’absorbance des échantillons à la courbe d’étalonnage, les résultats étant exprimés en pg/mg de protéines totales.

Analyse statistique

Toutes les données ont été analysées à l’aide de GraphPad Prism. Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± écart-type (ET). Les comparaisons entre plusieurs groupes ont été effectuées au moyen d’une ANOVA à un facteur suivie du test post hoc de Tukey, tandis que les comparaisons entre deux groupes ont été réalisées au moyen du test t de Student non apparié. La normalité de la distribution des données a été évaluée à l’aide du test de Shapiro-Wilk. Les valeurs aberrantes ont été identifiées au moyen de la méthode ROUT (Q = 1 %) et exclues si elles étaient biologiquement invraisemblables ou dues à une erreur technique. Les données manquantes étaient rares ; lorsqu’elles étaient présentes, elles ont été exclues de l’analyse par suppression de cas complets, car leur proportion était minime et n’avait aucune incidence sur la puissance statistique. Une valeur de p < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative.

Résultats

Études de la microstructure

Les résultats (Fig. 1) ont indiqué que les CNPs et les AMEPROCNPs présentaient toutes deux des surfaces lisses et des morphologies arrondies. Les particules présentaient une large distribution de tailles et n’étaient pas agrégées. Les mesures de la taille des particules ont révélé que les tailles moyennes des CNPs et des AMEPROCNPs étaient respectivement de ~504,95 ± 164,32 nm et de 591,97 ± 175,79 nm.

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L’analyse de la microstructure des systèmes d’hydrogel (Fig. 2) a mis en évidence la structure homogène des différentes formulations du système d’hydrogel.

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Essai de viabilité cellulaire

Les résultats (Fig. 3A) indiquent que le groupe témoin ne présentait aucune différence significative de viabilité cellulaire par rapport aux groupes HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-8, quel que soit le moment étudié. Nos hydrogels ont donc maintenu la viabilité des cellules encapsulées.

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Résultats de l’essai de gonflement

Les résultats (Fig. 3B) ont montré que les hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4, HYDROMenSC-CNP-8 et HYDROMenSC présentaient un profil de gonflement similaire pendant l’incubation dans les milieux de culture. À la 2e heure, les taux de gonflement des hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4, HYDROMenSC-CNP-8 et HYDROMenSC étaient respectivement d’environ 156,40 ± 7,98 %, 156,78 ± 12,06 %, 147,10 ± 10,16 % et 158,73 ± 5,79 %. À partir de ce moment, le taux de gonflement a progressivement diminué, pour atteindre respectivement 110,85 ± 1,95 %, 114,07 ± 6,66 %, 109,97 ± 8,22 % et 114,75 ± 5,83 % pour les hydrogels HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4, HYDROMenSC-CNP-8 et HYDROMenSC.

Résultats de l’essai de libération

Les résultats (Fig. 4) ont montré que la propolis et l’extrait d’Arnica montana étaient tous deux libérés de façon prolongée à partir de la matrice de l’hydrogel. Les trois formulations d’hydrogel ont présenté un profil de libération des médicaments similaire, caractérisé par une libération initiale rapide suivie d’une phase de libération prolongée qui s’est poursuivie pendant plus de 7 jours d’incubation dans les milieux.

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Essai anti-inflammatoire

Les résultats (Fig. 5A) ont montré que les hydrogels HYDROMenSC-CNP-8 présentaient une activité anti-inflammatoire significativement supérieure à celle des autres systèmes d’hydrogel. Les concentrations d’IL-6 et de TNF-α dans le groupe HYDROMenSC étaient significativement plus élevées que dans le groupe HYDROMenSC-CNP-4.

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Essai de cytoprotection

Les résultats (Fig. 5B) ont montré que les cellules cultivées avec le milieu conditionné par les hydrogels HYDROMenSC-CNP-8 présentaient une viabilité significativement supérieure à celle des cellules cultivées avec les milieux conditionnés par les autres hydrogels. Tous les systèmes d’hydrogel étudiés présentaient une viabilité cellulaire significativement supérieure à celle du groupe témoin.

Résultats de l’essai de piégeage des radicaux

Les résultats (Fig. 6A) ont montré que l’acide ascorbique présentait une activité de piégeage des radicaux significativement supérieure à celle des autres groupes à toutes les concentrations. L’activité de piégeage des radicaux du groupe AMEPROCNPs était significativement supérieure à celle du groupe CNPs.

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Résultats du test de mucoadhésion

L’adhérence du système d’hydrogel nanocomposite nouvellement formulé a été examinée en observant son déplacement sur une surface d’agar-mucine. L’adhésivité des hydrogels est d’autant plus élevée que leur déplacement est faible. Les résultats (Fig. 6B) ont montré que le groupe HYDROMenSC-CNP-8 présentait une capacité de mucoadhésion significativement supérieure à celle des autres groupes expérimentaux à tous les moments étudiés. HYDROMenSC-CNP-4 présentait un potentiel de mucoadhésion supérieur à celui du groupe HYDROMenSC-CNP-2 à tous les moments étudiés.

Résultats du temps de gélification, de l’analyse de la résistance du gel et de la mesure de la viscosité

Les résultats (Fig. 7) ont montré que, statistiquement, aucune différence significative n’avait été observée entre le temps de gélification ou la résistance du gel des systèmes d’hydrogel étudiés. Le temps de gélification du groupe HYDROMenSC-CNP-2, de HYDROMenSC-CNP-4, de HYDROMenSC-CNP-8 et de l’hydrogel HYDROMenSC a été mesuré à respectivement 373,00 ± 56,69 s, 371,84 ± 25,98 s, 392,15 ± 35,08 s et 435,50 ± 68,05 s. La résistance du gel du groupe HYDROMenSC-CNP-2, de HYDROMenSC-CNP-4, de HYDROMenSC-CNP-4 et de l’hydrogel HYDROMenSC était d’environ 22,63 ± 3,32 s, 22,43 ± 5,68 s, 22,43 ± 5,68 s, 24,53 ± 4,80 s et 24,46 ± 2,15 s.

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Les mesures de viscosité ont révélé que toutes les formulations d’hydrogel présentaient un comportement rhéofluidifiant typique, caractérisé par une diminution de la viscosité à mesure que le taux de cisaillement augmentait (Fig. 8). Ce comportement non newtonien et pseudoplastique est caractéristique des hydrogels biopolymériques et indique qu’ils conviennent à une application intranasale, pour laquelle la facilité d’administration et la rétention au site sont essentielles. L’hydrogel témoin sans nanovecteurs (HYDROMenSC) présentait une viscosité initiale de ~909,25 Pa·s à faible taux de cisaillement (0,1 s⁻¹), qui diminuait progressivement jusqu’à environ 9,10 Pa·s à des taux de cisaillement plus élevés (100 s⁻¹). Ce profil indique que la matrice de collagène seule oppose une résistance modérée à l’écoulement à de faibles taux de cisaillement, ce qui est attendu dans les systèmes de type gel. L’incorporation de nanoparticules dans la matrice de l’hydrogel a significativement modifié son profil de viscosité. La formulation HYDROMenSC-CNP-2, contenant 2 % d’AMEPROCNPs, présentait une viscosité initiale légèrement supérieure, d’environ 1 090,9090 Pa·s, qui diminuait jusqu’à ~11,88 Pa·s au taux de cisaillement le plus élevé. Cette hausse modeste de la viscosité par rapport au témoin suggère que les nanoparticules augmentent modérément la densité et la stabilité du réseau du gel. L’augmentation de la concentration de nanoparticules à 4 % (HYDROMenSC-CNP-4) a entraîné une hausse plus marquée de la viscosité initiale, qui atteignait environ 1 272,757 Pa·s à faible taux de cisaillement et diminuait jusqu’à 13,86 Pa·s à des taux de cisaillement plus élevés. Cette amélioration supplémentaire peut être attribuée à l’interaction accrue entre les nanoparticules et la matrice de collagène, qui conduit à un réseau plus structuré et plus cohésif. La formulation présentant la concentration la plus élevée de nanoparticules (8 %, HYDROMenSC-CNP-8) a présenté l’augmentation de viscosité la plus importante, avec une valeur initiale d’environ 1 636,484 Pa·s qui diminuait jusqu’à environ 17,82 Pa·s à mesure que le taux de cisaillement augmentait. Cette élévation significative de la viscosité indique que la densité plus élevée de nanoparticules renforce considérablement la structure de l’hydrogel, la rendant plus résistante à la déformation dans des conditions de faible cisaillement.

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Essai de libération cellulaire

Les résultats de l’essai de libération cellulaire présentés à la Fig. 12B montrent le pourcentage de cellules libérées par les différentes formulations d’hydrogel, notamment HYDROMenSC-CNP-2, HYDROMenSC-CNP-4, HYDROMenSC-CNP-8 et HYDROMenSC. Les données indiquent que les quatre systèmes d’hydrogel présentaient des efficacités de libération cellulaire similaires, sans différence statistiquement significative entre les groupes. Ces résultats suggèrent que l’incorporation de CNPs à différentes concentrations (2 %, 4 % et 8 %) n’a pas influencé de manière significative la capacité de la matrice de l’hydrogel à libérer les cellules encapsulées.

Résultats de l’étude in vivo

Évaluation histologique

L’évaluation histologique (Fig. 9 et 10) a révélé que, dans le groupe témoin positif, les structures de la muqueuse nasale avaient pu retrouver leur aspect normal, sans signe d’œdème, de congestion vasculaire ni d’infiltration de cellules inflammatoires dans la sous-muqueuse. En revanche, les groupes témoin négatif et HYDRO présentaient un œdème important, une structure désorganisée, une congestion vasculaire, une infiltration de cellules inflammatoires et de nombreux éosinophiles. Le groupe HYDROMenSC-CNP-8 présentait une réduction substantielle de l’œdème, de la congestion vasculaire et de l’infiltration d’éosinophiles dans la muqueuse nasale. Bien que les groupes HYDROMenSC-CNP-2 et HYDROMenSC-CNP-4 aient également présenté une diminution de l’œdème et de la congestion vasculaire, l’infiltration d’éosinophiles dans ces groupes demeurait nettement plus élevée que dans les groupes HYDROMenSC-CNP-8 et témoin positif. De plus, l’œdème et la congestion vasculaire étaient significativement plus prononcés dans le groupe HYDRO-CNP que dans le groupe HYDROMenSC.

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Numération des éosinophiles

Les résultats (Fig. 11) ont montré que les groupes témoin positif et HYDROMenSC-CNP-8 présentaient une numération des éosinophiles significativement inférieure à celle des autres groupes expérimentaux. Statistiquement, aucune différence significative n’a été observée entre les groupes témoin positif et HYDROMenSC-CNP-8. Les groupes HYDROMenSC-CNP-4 et HYDROMenSC-CNP-2 présentaient une numération des éosinophiles significativement inférieure à celle des groupes HYDROMenSC, HYDRO-CNP, HYDRO et témoin négatif.

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Résultats de l’évaluation des symptômes de la RA

Les résultats (Fig. 11) ont montré que les groupes témoin positif et HYDROMenSC-CNP-8 présentaient des scores de symptômes de la RA significativement inférieurs à ceux des autres groupes expérimentaux. Statistiquement, aucune différence significative n’a été observée entre les groupes témoin positif et HYDROMenSC-CNP-8. Les groupes HYDROMenSC-CNP-2 et HYDROMenSC-CNP-4 présentaient des scores de symptômes de la RA significativement inférieurs à ceux du groupe témoin négatif.

Résultats du dosage ELISA

Les résultats (Fig. 12) ont montré que les groupes témoin positif et HYDROMenSC-CNP-8 présentaient des niveaux d’expression tissulaire d’IL-4, d’IL-5, d’IL-13 et de TNF-α significativement inférieurs à ceux des autres groupes expérimentaux. Le niveau d’expression tissulaire du TNF-α dans le groupe témoin positif était significativement inférieur à celui du groupe HYDROMenSC-CNP-8. L’expression de l’IFN-γ dans le groupe HYDROMenSC-CNP-8 était significativement supérieure à celle des autres groupes expérimentaux.

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Discussion

Les systèmes d’hydrogel offrent une approche prometteuse pour traiter la RA en assurant une libération prolongée des agents thérapeutiques, en améliorant la stabilité des médicaments et en favorisant l’observance des patients grâce à des effets localisés et durables. Dans cette étude, nous avons élaboré un système d’administration nanocomposite utilisant un hydrogel de collagène et des CNPs afin d’administrer de la propolis, de l’extrait d’Arnica montana et des MenSCs dans les narines d’un modèle de rhinite allergique chez le rat. Les systèmes de nanovecteurs que nous avons élaborés présentaient une taille submicronique et une morphologie sphérique. Ces caractéristiques influencent considérablement l’efficacité des CNPs dans l’administration de médicaments par voie muqueuse en améliorant leur capacité à franchir les barrières muqueuses, à accroître l’absorption des médicaments et à assurer une libération contrôlée et prolongée des agents thérapeutiques. Le système d’hydrogel conçu pour l’administration de MenSCs et de nanovecteurs n’a présenté aucun effet cytotoxique et a efficacement préservé la viabilité cellulaire, comme l’a montré le dosage MTT. Cela peut être attribué à la biocompatibilité des hydrogels de collagène, qui imitent la matrice extracellulaire naturelle et favorisent ainsi la croissance cellulaire, la réparation tissulaire et la libération contrôlée des médicaments. Outre le maintien de la viabilité, les hydrogels HYDROMenSC-CNP-8 ont présenté des effets cytoprotecteurs significativement renforcés dans des conditions de stress oxydatif. Cette protection est probablement due à l’effet synergique de l’activité de piégeage des radicaux de la propolis et de l’extrait d’Arnica montana, ainsi qu’aux propriétés antiapoptotiques intrinsèques des MenSCs. À l’appui de cette hypothèse, Shang et ses collaborateurs ont indiqué que le milieu conditionné par les MenSCs améliorait significativement la viabilité des cellules lésées par H₂O₂ et réduisait l’apoptose, potentiellement par une régulation positive de la protéine antiapoptotique Bcl-2 et de la protéine proliférative Akt. Pris ensemble, ces résultats soulignent la capacité de l’hydrogel à la fois à soutenir la fonction des cellules souches et à les protéger des lésions oxydatives. La capacité de gonflement des systèmes d’hydrogel peut influencer considérablement leur comportement de libération des cellules et des médicaments. Le comportement de gonflement observé dans l’hydrogel nanocomposite que nous avons élaboré peut s’expliquer par le fait que l’hydrogel atteint l’équilibre de gonflement au sommet de la courbe du pourcentage de gonflement. La diminution ultérieure de la capacité de gonflement est probablement due à la dégradation progressive de la matrice de collagène. Nous prévoyons toutefois que les cellules pourraient remodeler la matrice de collagène, réduisant ainsi sa vitesse de dégradation. La libération de propolis et d’extrait d’Arnica montana à partir de la matrice de l’hydrogel nanocomposite peut être attribuée à des mécanismes de diffusion, de gonflement et d’érosion. La libération initiale rapide de l’extrait chargé est probablement due à sa présence dans la couche la plus externe des nanovecteurs. Le profil de libération des molécules bioactives à partir des systèmes d’hydrogel ne présente pas de corrélation directe avec la concentration des nanovecteurs incorporés, ce qui peut sembler contre-intuitif. Plusieurs facteurs expliquent toutefois cette observation. Premièrement, il importe de noter que les valeurs présentées dans les graphiques de libération représentent la libération cumulée et non les quantités réelles de molécules bioactives libérées à chaque moment. Les données de libération cumulée montrent la quantité totale de composés bioactifs libérée au fil du temps par le système d’hydrogel, en cumulant les quantités libérées aux moments précédents. En outre, l’augmentation de la concentration des nanovecteurs dans l’hydrogel accroît également la densité et la rigidité de la matrice, ce qui peut entraver la diffusion des molécules bioactives malgré une charge en nanoparticules plus élevée. De plus, des concentrations plus élevées de nanovecteurs peuvent entraîner l’agrégation des nanoparticules et la formation d’amas au sein de l’hydrogel, ce qui diminue la surface efficace disponible pour la libération des médicaments. Par conséquent, l’absence apparente de corrélation entre la concentration des nanovecteurs et la libération des molécules bioactives est due aux effets combinés de la présentation des données cumulées, des modifications de la densité de la matrice, de la restriction de la diffusion et de l’agrégation potentielle des nanoparticules. Les résultats de l’essai anti-inflammatoire ont montré que les hydrogels HYDROMenSC-CNP-8 présentaient une activité anti-inflammatoire significativement supérieure à celle des autres groupes expérimentaux. Ce résultat peut être attribué à la fonction immunomodulatrice synergique des MenSCs, de la propolis et de l’extrait d’Arnica montana. La propolis exerce ses effets immunomodulateurs par plusieurs mécanismes, principalement en modifiant la production de cytokines, en influençant l’activité des cellules immunitaires et en agissant sur les voies de signalisation. Selon sa concentration, la propolis peut stimuler ou inhiber la production de diverses cytokines, telles que le TNF-α et l’IL-10. Elle active les monocytes, les macrophages et les neutrophiles, renforce l’activité des cellules tueuses naturelles et module les réponses des lymphocytes T et B. De plus, la propolis agit sur des voies de signalisation telles que l’ERK2/MAP-kinase et influe sur des facteurs de transcription tels que NFAT et NF-κB. L’extrait d’Arnica montana inhibe la liaison de NF-κB à l’ADN et sa translocation nucléaire, en ciblant spécifiquement les sous-unités p65 et p50. Il réduit en outre l’affinité du récepteur de l’IL-2 en raison d’une diminution de l’expression de CD25. D’autre part, les MenSCs réduisent l’expression de TLR4, MyD88, NLRP3 et Caspase-1 et atténuent les réactions inflammatoires. Les MenSCs modulent également la différenciation et l’activation des cellules Th2 et des macrophages M2, toutes deux liées aux réponses anti-inflammatoires. L’essai DPPH a confirmé que l’incorporation de propolis et d’extrait d’Arnica montana dans les CNPs conférait à ces nanovecteurs une activité antioxydante significative. La propolis est riche en composés antioxydants, notamment l’acide caféique et l’acide férulique, qui renforcent ses puissantes activités antioxydantes et de piégeage des radicaux libres. Les polyphénols de la propolis neutralisent les radicaux principalement par transfert d’atomes d’hydrogène de leurs groupes hydroxyle vers les radicaux. Le mécanisme antioxydant de l’extrait d’Arnica montana est complexe et comprend le piégeage direct des radicaux libres, une teneur élevée en composés phénoliques et en flavonoïdes ainsi que le renforcement des défenses antioxydantes cellulaires. Le test de mucoadhésion a montré que l’augmentation des AMEPROCNPs renforçait l’adhérence de l’hydrogel nanocomposite à la muqueuse. La charge positive du chitosane, due aux groupes amine, permet une interaction électrostatique avec la couche de mucus chargée négativement, facteur essentiel de sa mucoadhésion. Il forme également des liaisons hydrogène avec les glycoprotéines du mucus, renforçant ainsi la mucoadhésion. Les chaînes polymériques du chitosane peuvent s’interpénétrer et s’enchevêtrer dans la couche de mucus, les poids moléculaires plus élevés permettant une meilleure interpénétration et une adhérence plus forte. Les résultats de l’étude in vivo ont montré que les hydrogels HYDROMenSC-CNP-8 atténuaient significativement les symptômes de la RA, avec des effets comparables à ceux observés avec le propionate de fluticasone. Il est possible que les propriétés anti-inflammatoires de la propolis, de l’extrait d’Arnica montana et des MenSCs aient créé un environnement protecteur contre la RA. Cette théorie a été confirmée par les résultats du dosage ELISA. Nous avons observé que les concentrations tissulaires d’IL-4, d’IL-5, d’IL-13 et de TNF-α étaient diminuées chez les animaux traités avec les hydrogels HYDROMenSC-CNP-8. Ces cytokines intervenant principalement dans la progression des symptômes de la RA, leur diminution suggère que le système d’administration élaboré a efficacement ciblé ces cytokines et atténué les symptômes de la RA. L’extrait de propolis verte brésilienne administré par voie orale a réduit les éternuements, les symptômes nasaux et les taux de marqueurs inflammatoires tels que le récepteur H1 de l’histamine et les cytokines IL-4, IL-5 et IL-9 chez des rats présentant une rhinite allergique induite. Les propriétés antiallergiques de la propolis sont attribuées à sa capacité à inhiber l’activation des cellules épithéliales, des mastocytes, des basophiles et des éosinophiles, ainsi que la libération de médiateurs allergiques. Les principaux composés antiallergiques de la propolis comprennent des flavonoïdes tels que la chrysine, le kaempférol, la galangine et la pinocembrine, ainsi que des dérivés de l’acide cinnamique tels que l’ester phénéthylique de l’acide caféique et l’artépilline. Bien que les effets protecteurs de l’extrait d’Arnica montana sur la RA n’aient pas été élucidés auparavant, il est possible que l’hélénaline, une lactone sesquiterpénique présente dans Arnica montana, inhibe le facteur de transcription NF-κB, à l’instar des corticostéroïdes, réduisant ainsi l’expression des gènes pro-inflammatoires. De plus, certains extraits d’arnica perturbent l’expression génique dépendante de NFAT, essentielle à l’activation des lymphocytes T et à la production de cytokines. Les données relatives à l’activité antiallergique des MenSCs sont rares dans la littérature ; toutefois, des études similaires ont utilisé d’autres cellules souches/stromales mésenchymateuses (MSCs) pour traiter la RA. Dans ce contexte, Ebrahim et ses collaborateurs ont montré que les MSCs dérivées du tissu adipeux réduisaient les symptômes de la RA et diminuaient significativement les niveaux d’expression tissulaire des cytokines pro-inflammatoires dans un modèle murin de RA. Il semble que l’activité immunomodulatrice des MSCs soit le mécanisme sous-jacent par lequel ces cellules atténuent la RA.

Bien que les résultats de cette étude soient prometteurs, plusieurs limites doivent être reconnues. Premièrement, l’efficacité thérapeutique du système d’hydrogel nanocomposite n’a été évaluée que dans un modèle de rhinite allergique chez le rat, qui pourrait ne pas reproduire pleinement la complexité de la maladie humaine. Deuxièmement, bien que l’hydrogel ait démontré des propriétés anti-inflammatoires, antioxydantes et cytoprotectrices, les mécanismes moléculaires sous-jacents, tels que les voies de signalisation spécifiques intervenant dans la modulation immunitaire, n’ont pas été étudiés de manière exhaustive. Troisièmement, la biocompatibilité à long terme, la vitesse de biodégradation et les éventuelles réponses immunogènes du système d’hydrogel n’ont pas été évaluées. En outre, le changement d’échelle et la reproductibilité de l’isolement des MenSCs et de la formulation de l’hydrogel pourraient poser des difficultés pour le transfert clinique. De futures études portant sur des modèles animaux de plus grande taille, des périodes de suivi prolongées et des analyses mécanistiques sont nécessaires afin de valider et d’optimiser cette approche thérapeutique pour des applications cliniques.

Conclusion

Dans cette étude, nous avons élaboré un système innovant d’hydrogel nanocomposite incorporant de l’extrait d’Arnica montana, des CNPs chargées en propolis et des MenSCs pour le traitement de la RA. Cette plateforme multifonctionnelle a assuré une libération prolongée des composés bioactifs, préservé la viabilité des cellules souches et exercé des effets anti-inflammatoires et antioxydants significatifs, tant in vitro qu’in vivo. Il convient de noter que l’hydrogel HYDROMenSC-CNP-8 s’est montré supérieur aux autres formulations pour atténuer les symptômes de la RA, réduire les concentrations de cytokines pro-inflammatoires et restaurer la structure de la muqueuse, en obtenant des résultats thérapeutiques comparables et, à certains égards, supérieurs au traitement standard par le propionate de fluticasone. Contrairement aux traitements conventionnels qui ciblent principalement la suppression des symptômes, ce système d’hydrogel offre une approche régénératrice et immunomodulatrice, qui agit à la fois sur les symptômes et sur la physiopathologie sous-jacente de la RA. Ces résultats soulignent son potentiel en tant que solution de remplacement plus sûre et plus efficace aux traitements pharmacologiques actuels, avec de vastes perspectives pour la prise en charge d’autres affections inflammatoires et allergiques.