Effets antiapoptotiques et antinociceptifs de l’extrait aqueux d’Achillea millefolium L. chez des rats atteints de neuropathie diabétique douloureuse expérimentale
Référence : Research in Pharmaceutical Sciences 2024. — PMC11648340/PMID 39691295 · DOI 10.4103/RPS.RPS_140_23 Type : etude in vivo · Plante : Achillee millefeuille · Propriété → Neuro & cognition Accès : ⭐ libre (open access) → texte intégral traduit Fidélité : traduction intégrale et fidèle du texte des auteurs. Appels [n] omis ; figures/tableaux « [ ] ».
Résumé
Contexte et objectif :
La neuropathie est l’une des complications courantes du diabète sucré. Cette étude visait à déterminer les effets analgésiques et antiapoptotiques de l’extrait aqueux d’Achillea millefolium L. (Ach) chez des rats atteints de neuropathie diabétique douloureuse expérimentale au moyen de procédures comportementales et moléculaires.
Approche expérimentale :
Trente rats Wistar mâles ont été répartis en 5 groupes, comprenant contrôle, diabète + solution saline, et diabète + extrait d’Ach (doses de 150, 300 et 600 mg/kg/jour pendant 3 semaines, par voie orale). Un test de retrait de la queue a été réalisé pour évaluer le seuil de douleur dans les différents groupes. Le western blot a été utilisé pour évaluer les facteurs protéiques apoptotiques (Bax, Bcl2, caspase-3 clivée et cytochrome-c) et inflammatoires (TNF-α et NF-κB) dans la portion lombaire du tissu de la moelle épinière. De plus, des kits commerciaux de dosage ont été utilisés pour évaluer les facteurs de stress oxydatif (MDA, GPx et activité enzymatique de la SOD) dans la portion lombaire du tissu de la moelle épinière.
Observations/Résultats :
Les résultats ont montré que l’administration de l’extrait d’Ach aux doses de 300 et 600 mg/kg/jour augmentait significativement le seuil de nociception chez les animaux diabétiques traités par comparaison avec les animaux diabétiques non traités. En outre, le traitement des animaux diabétiques par l’extrait d’Ach (300 et 600 mg/kg/jour) réduisait significativement les indicateurs biochimiques du stress oxydatif, de l’inflammation et de l’apoptose dans le tissu de la moelle épinière lombaire par comparaison avec le groupe diabétique non traité.
Conclusion et implications :
Les observations ont montré que l’extrait d’Ach possède des effets neuroprotecteurs et antinociceptifs chez les rats atteints de neuropathie diabétique. Ces effets peuvent être dus à l’inhibition du stress oxydatif, de l’inflammation et de l’apoptose dans le tissu de la moelle épinière.
Introduction
Le diabète sucré est l’une des maladies métaboliques chroniques les plus courantes, touchant des millions de personnes dans le monde. Les troubles de la régulation métabolique dus au diabète provoquent des modifications physiopathologiques secondaires dans les différents organes du corps, responsables de la majeure partie de l’invalidité et de la mortalité causées par le diabète. Le diabète sucré est associé à plusieurs complications à long terme, notamment la neuropathie, la rétinopathie et la néphropathie. La neuropathie diabétique peut se présenter sous forme de polyneuropathie, de mononeuropathie ou de neuropathie autonome. La douleur neuropathique, qui survient habituellement dans les extrémités inférieures, est également une caractéristique de la polyneuropathie diabétique. L’hyperglycémie est un élément majeur de l’apparition et de la progression de la neuropathie diabétique chez les patients atteints de cette maladie. Une étude récente s’est concentrée sur les processus biochimiques et moléculaires conduisant aux complications de la neuropathie diabétique. Des modèles in vivo et in vitro de neuropathie diabétique ont été étudiés afin d’identifier les principaux mécanismes biochimiques responsables des complications, ce qui peut constituer une étape importante dans leur traitement.
La plupart des mécanismes sont liés aux systèmes métaboliques cellulaires et d’oxydoréduction. L’augmentation du stress oxydatif cellulaire active la voie de la polymérase (ADP-ribose). Elle modifie l’expression des gènes impliqués dans la régulation de l’inflammation et de la fonction neuronale, conduisant finalement à la destruction et à la mort cellulaires par des mécanismes d’apoptose. Comme mentionné ci-dessus, la neurodégénérescence provoquée par une glycémie élevée dans les conditions diabétiques entraîne une douleur neuropathique par divers mécanismes neuroanatomiques, neurophysiologiques et neurochimiques. La douleur neuropathique survient soit spontanément, soit à la suite d’un stimulus légèrement douloureux, et provoque des symptômes douloureux. Achillea millefolium L. (Ach), communément appelée achillée millefeuille, est l’une des plantes bien connues appartenant à la famille des Asteraceae. La plante est l’une des plantes médicinales les plus célèbres, largement utilisée dans la médecine ancienne de différentes cultures, ainsi que dans les pays européens et asiatiques, pour traiter de nombreuses maladies. L’histoire de la culture et de la consommation de la plante remonte à 3000 ans. Les rameaux fleuris des plantes sont utilisés en médecine traditionnelle et sont récoltés en été. La plante aromatique possède diverses propriétés médicinales, telles que des propriétés anti-inflammatoires, antioxydantes et antiapoptotiques. Des études ont montré que la lutéoline, l’apigénine et le kaempférol, principaux composés polyphénoliques d’Ach, sont responsables des propriétés anti-inflammatoires, antioxydantes et neuroprotectrices de cette plante. Il a également été montré que l’extrait d’Ach exerce un effet antinociceptif dans des modèles animaux. Au regard de l’effet pharmacologique mentionné d’Ach et de ses principaux composés phénoliques, cette étude visait à déterminer les effets antiapoptotiques et antinociceptifs de l’extrait aqueux d’Ach dans un modèle animal de neuropathie diabétique expérimentale.
Matériels et méthodes
Médicaments et produits chimiques
La streptozotocine (STZ) a été achetée auprès de Sigma-Aldrich Company (St. Louis, Missouri, États-Unis). Les kits commerciaux de dosage biochimique du malondialdéhyde (MDA), de la glutathion peroxydase (GPx) et de la superoxyde dismutase (SOD) ont été obtenus auprès de Zellbio Company (Lonsee, Allemagne). Les anticorps dirigés contre la protéine x associée à Bcl-2 (Bax), le lymphome à cellules B 2 (Bcl2), la caspase-3 clivée, le cytochrome-c, le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α) et le facteur nucléaire kappa B (NF-κB) ont été obtenus auprès d’Abcam Company (Cambridge, Royaume-Uni). Le papier de polyfluorure de vinylidène (PVDF) et un kit de chimioluminescence améliorée (ECL) ont été obtenus auprès de Roshe Company (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Allemagne).
Animaux
Dans cette étude, 30 rats Wistar mâles pesant 200-250 g ont été fournis par l’animalerie de l’Université des sciences médicales de Rafsanjan. Les animaux ont été hébergés dans des conditions standard comprenant une température de 23 ± 1 °C, un accès libre à de l’eau et à de la nourriture en quantité suffisante, et un cycle obscurité/lumière de 12 h/12 h. La réduction au minimum de la souffrance animale a été prise en considération pendant toute la période expérimentale. Toutes les procédures ont été approuvées par le comité d’éthique de l’Université des sciences médicales de Rafsanjan (code d’éthique : IR.RUMS.REC.1399.111) et réalisées selon les Guidelines for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH, publication n° 85-23, révisée en 1985 ; directive 2010/63/UE des Communautés européennes).
Groupes expérimentaux
Les animaux ont été répartis aléatoirement en 5 groupes expérimentaux (6 rats dans chaque groupe), comme suit : le groupe 1 (contrôle) comprenait des rats non diabétiques recevant une solution saline normale par voie orale pendant 3 semaines ; le groupe 2 (diabète + solution saline) comprenait des rats diabétiques recevant une solution saline normale par voie orale pendant 3 semaines ; les groupes 3, 4 et 5 comprenaient des rats diabétiques recevant l’extrait d’Ach par voie orale aux doses de 150 (diabète + Ach 150), 300 (diabète + Ach 300) et 600 mg/kg/jour (diabète + Ach 600) pendant 3 semaines, respectivement.
Extraction du matériel végétal et analyse par chromatographie liquide haute performance
La plante Ach a été achetée auprès de l’herbier botanique d’Ispahan en juillet 2021 (spécimen n° 4007). Les rameaux fleuris de la plante ont été coupés et broyés après avoir été nettoyés et séchés. Deux cents mL d’eau distillée ont été percolés avec 2 g de plante en poudre pendant 24 h. L’extrait a été séché et évaporé après filtration au moyen de papier filtre (8-10 μ). Selon l’étude d’Ayoobi, la dose humaine recommandée est de 2-4 g de fleurs et de tiges séchées, équivalant à 250-500 mg de l’extrait aqueux séché, et nous l’avons utilisée dans l’investigation actuelle. Pour quantifier les flavonoïdes dans l’échantillon extrait, la chromatographie liquide haute performance (HPLC) a été utilisée.
Protocole expérimental
Induction du diabète et traitement par l’extrait d’Ach
L’induction du diabète a été réalisée par une injection sous-cutanée unique de STZ (55 mg/kg). La STZ a été fraîchement dissoute dans un tampon citrate (CB) à 0,1 mol/L. Des rats non diabétiques recevant une injection de CB ont été utilisés comme groupe contrôle. Une semaine après l’injection de STZ, l’échantillon sanguin a été prélevé via la veine caudale latérale. Ensuite, la glycémie a été mesurée enzymatiquement au moyen d’un kit glucose oxydase-peroxydase (Pars Azmon Co., Iran). Une glycémie supérieure à 250 mg/dL a été considérée comme une mesure du diabète. Une semaine après l’injection de STZ et l’induction du diabète, l’extrait aqueux d’Ach a été dissous dans une solution saline et administré aux groupes expérimentaux respectifs au moyen d’une sonde gastrique quotidiennement pendant 3 semaines.
Test de retrait de la queue pour mesurer le seuil de nociception
Un test de retrait de la queue a été utilisé pour mesurer le seuil de nociception dans les groupes expérimentaux. Dans le test, l’intensité du faisceau de l’appareil a été ajustée entre 4 et 6 s au tiers moyen de la queue des animaux témoins. Un temps limite de 15 s a également été considéré afin d’éviter toute lésion tissulaire de la queue de l’animal. Le test a été réalisé 3 fois avec un intervalle de 3 min au moyen d’un appareil de retrait de la queue (Ugo Basile, Italie). Ensuite, la moyenne du temps de retrait de la queue a été considérée comme le seuil de nociception (latence de retrait de la queue) pour chaque animal. Le test a été effectué une fois par semaine pendant 4 semaines.
Extraction tissulaire et préparation pour les évaluations moléculaires
Comme décrit précédemment, à la fin de la période d’étude comportementale, les rats ont été anesthésiés par inhalation de CO₂ et décapités. Les vertèbres avaient été sectionnées à travers la ceinture pelvienne. L’extrusion hydraulique a été réalisée en insérant une aiguille de calibre 16 dans le canal rachidien sacré et en injectant une solution saline glacée. Le tissu de la moelle épinière ainsi obtenu a été immédiatement placé sur de la glace dans une boîte de Petri en verre, et la moitié dorsale de la moelle épinière lombaire a été disséquée. Les échantillons tissulaires ont été pesés, immédiatement congelés et conservés dans une cuve d’azote liquide. Après cela, le tissu isolé a été homogénéisé dans un tampon de dosage par radio-immunoprécipitation refroidi sur glace contenant du Tris-HCl (10 mM, pH 7,4), 1 mM d’EDTA, 0,1 % de dodécylsulfate de sodium (SDS), 0,1 % de désoxycholate de Na, 1 % de NP-40, des inhibiteurs de protéases (1 mM de fluorure de phénylméthylsulfonyle, 2,5 μg/mL de leupeptine et 10 μg/mL d’aprotinine), et 1 mM d’orthovanadate de sodium. Les tissus homogénéisés ont été centrifugés à 4 °C pendant 20 min (14000 rpm), et le surnageant a été recueilli. La concentration protéique dans le surnageant a été mesurée par la méthode de Bradford.
Analyse par western blot
Le western blot a été utilisé pour évaluer l’expression de certaines protéines apoptotiques (Bax, Bcl2, caspase 3 clivée et cytochrome-c) et inflammatoires (TNF-α et NF-κB) dans la portion dorsale du tissu de la moelle épinière lombaire. Quarante μg de chaque échantillon protéique ont été utilisés pour l’électrophorèse sur gel de polyacrylamide-SDS (PAGE) à 12,5 %. Après électrophorèse, les protéines ont été transférées électriquement du SDS-PAGE au papier PVDF. Le papier PVDF a ensuite été immergé dans un tampon de blocage (lait écrémé à une concentration de 5 % dans une solution saline tamponnée au Tris contenant 0,1 % de détergent Tween 20 (TBS-T)) pendant 2 h à température ambiante. La solution TBS-T a été utilisée pendant 5 min (3 fois) pour éliminer l’excès de tampon de blocage sur le papier PVDF. Le papier PVDF a ensuite été immergé dans un tampon de blocage (TBS-T, 150 mM de NaCl, 20 mM de Tris-HCl avec pH 7,5, et 0,1 % de Tween 20) contenant les anticorps primaires (1:1000 μL) pendant la nuit à 4 °C. Pour éliminer l’excès de solution d’anticorps primaires, le papier PVDF a été lavé avec une solution TBS-T. Ensuite, un anticorps secondaire conjugué à la peroxydase de raifort a été utilisé. Les complexes anticorps-antigène ont été détectés via le système ECL et exposés à un film de détection chimioluminescente lumi-film (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Allemagne). L’immunoblotting de la β-actine a été utilisé comme contrôle de charge/interne. Les densités des bandes ont été évaluées au moyen de la densitométrie des bandes correspondantes. Le programme de traitement d’images ImageJ (1.52r, National Institutes of Health, États-Unis) a été utilisé pour analyser l’intensité d’expression. Les valeurs ont été exprimées sous forme de rapport protéine testée/β-actine pour chaque échantillon.
Mesure du stress oxydatif
Les marqueurs du stress oxydatif, comprenant le MDA et les activités enzymatiques de la GPx et de la SOD dans le tissu de la moelle épinière lombaire, ont été évalués en utilisant les instructions du fabricant des kits commerciaux de dosage biochimique.
Analyse statistique
Le test de Shapiro-Wilk a été utilisé pour vérifier la normalité de la distribution des données. L’égalité des variances a été évaluée au moyen du test de Levene. Les données obtenues à partir des analyses comportementales et moléculaires ont été exprimées sous forme de moyenne ± SEM. Une ANOVA à deux facteurs pour mesures répétées suivie du post-test de Sidak a été utilisée pour comparer la glycémie sérique et le poids corporel entre le début et la fin de l’étude. Une ANOVA à un facteur suivie des tests post hoc de Bonferroni et de Tukey a été utilisée pour comparer la glycémie et le poids corporel entre les groupes à chaque point temporel (début ou fin de l’étude), respectivement. Une ANOVA ordinaire à deux facteurs suivie du test post hoc de Tukey a été utilisée pour comparer les données de retrait de la queue au même point temporel entre les groupes. De plus, une ANOVA à un facteur suivie du test post hoc de Tukey a été utilisée pour comparer les données biochimiques et moléculaires. Le seuil de signification a été fixé à P < 0,05.
Résultats
Analyse phytochimique de l’extrait d’Ach
Les résultats de HPLC pour la quantification des flavonoïdes dans l’échantillon extrait ont montré 1,6 mg/g d’apigénine et 0,3 mg/g de lutéoline (Tableau 1).
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Effet de l’extrait aqueux d’Ach sur la glycémie sérique et le poids corporel
Une semaine après l’injection de STZ, la glycémie sérique des groupes diabétiques a augmenté significativement par comparaison avec le groupe contrôle, et cette augmentation s’est maintenue jusqu’à la fin de la période expérimentale (Tableau 2). De plus, le poids corporel dans le groupe diabète + solution saline a été significativement réduit à la fin de la période expérimentale par comparaison avec le groupe contrôle. Le Tableau 2 révèle que le traitement des rats diabétiques par les doses de 300 et 600 mg/kg d’extrait aqueux d’Ach a significativement réduit la glycémie sérique et augmenté le poids corporel à la fin de l’expérience par comparaison avec le groupe diabète + solution saline. Le traitement par la dose de 150 mg/kg d’extrait aqueux d’Ach n’a pas montré d’effets d’amélioration significatifs sur la glycémie sérique et le poids corporel chez les animaux diabétiques à la fin de l’étude par comparaison avec le groupe diabète + solution saline (Tableau 2).
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Effet de l’extrait d’Ach sur le seuil de nociception
Deux semaines après l’injection de STZ, le groupe diabète + solution saline a présenté une diminution significative du seuil de nociception par comparaison avec le groupe contrôle, et celle-ci s’est poursuivie jusqu’à la fin de l’étude. De plus, le traitement des animaux diabétiques par les doses de 300 et 600 mg/kg d’Ach a significativement augmenté le seuil de nociception par comparaison avec le groupe diabète + solution saline. Il convient de mentionner que le traitement par la dose de 150 mg/kg d’Ach n’a eu aucun effet significatif sur le seuil de nociception par comparaison avec les animaux diabétiques non traités (Fig. 1).
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Effet de l’extrait d’Ach sur le niveau de stress oxydatif dans le tissu de la moelle épinière lombaire
Les données ont montré une augmentation significative des niveaux de MDA (comme indicateur de la peroxydation lipidique) dans le tissu de la moelle épinière lombaire dans le groupe diabétique non traité par comparaison avec le groupe contrôle (Fig. 2A). Les résultats ont également montré une diminution significative des niveaux de MDA dans les groupes diabétiques traités par Ach aux doses de 300 et 600 mg/kg par comparaison avec le groupe diabétique non traité, indiquant une diminution du stress oxydatif dans le tissu de la moelle épinière (Fig. 2A). De plus, les niveaux des activités enzymatiques de la GPx et de la SOD (comme système de défense antioxydant cellulaire) ont diminué significativement dans le groupe diabétique non traité par comparaison avec le groupe non diabétique (Fig. 2B et 2C). Les niveaux d’activité de l’enzyme GPx dans les groupes diabétiques traités par les doses de 300 et 600 mg/kg d’Ach ont montré une augmentation significative par comparaison avec le groupe diabétique non traité (Fig. 2B). En outre, le traitement des animaux diabétiques par les doses de 300 et 600 mg/kg d’Ach a significativement élevé l’activité enzymatique de la SOD dans le tissu de la moelle épinière lombaire par comparaison avec le groupe diabète + solution saline (Fig. 2C).
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Effet de l’extrait d’Ach sur les biomarqueurs apoptotiques dans le tissu de la moelle épinière lombaire
Selon la Fig. 3, les niveaux d’expression des protéines pro-apoptotiques Bax, cytochrome-c et caspase-3 clivée, ainsi que le rapport Bax/Bcl2 dans la moelle épinière lombaire, ont augmenté dans le groupe diabétique non traité par comparaison avec le groupe contrôle. Cependant, le traitement des groupes diabétiques par les doses de 300 et 600 mg/kg d’Ach a diminué l’expression du cytochrome-c, de la caspase-3 clivée et du rapport Bax/Bcl2 par comparaison avec le groupe diabétique non traité.
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L’expression de Bax a montré une réduction significative uniquement dans le groupe diabète + Ach 600 par comparaison avec le groupe diabète + solution saline. Ces observations peuvent être considérées comme une diminution du niveau d’apoptose dans le tissu de la moelle épinière lombaire. En outre, le niveau d’expression de Bcl2 (comme protéine antiapoptotique) a montré une diminution significative dans le groupe diabétique non traité par comparaison avec les rats non diabétiques. D’autre part, le groupe diabétique traité par Ach à la dose de 600 mg/kg a montré une augmentation significative de l’expression de la protéine Bcl2 par comparaison avec le groupe diabétique non traité.
Effet de l’extrait d’Ach sur les biomarqueurs inflammatoires dans le tissu de la moelle épinière lombaire
Les résultats ont montré que les niveaux d’expression de NF-κB et de TNF-α, en tant que biomarqueurs inflammatoires dans la moelle épinière lombaire, augmentaient significativement dans le groupe diabétique non traité par comparaison avec le groupe contrôle (Fig. 4). D’autre part, les groupes diabétiques traités par Ach aux doses de 300 et 600 mg/kg ont présenté des niveaux d’expression significativement diminués des protéines NF-κB et TNF-α par comparaison avec le groupe diabétique non traité (Fig. 4).
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Discussion
La neuropathie diabétique est l’une des complications les plus courantes du diabète sucré. Cependant, les principales causes de cette complication ne sont pas encore bien connues. En outre, le traitement direct de la neuropathie diabétique et la réduction de la douleur causée par les complications au moyen des traitements médicamenteux disponibles ne sont pas très efficaces. Par conséquent, il est important d’étudier les mécanismes de la neuropathie diabétique et d’identifier les composés et les médicaments qui la traitent. Dans la présente étude, le test de retrait de la queue a été utilisé pour montrer l’incidence de l’hyperalgésie, comme caractéristique marquante de la neuropathie diabétique. Les observations ont montré que 2 semaines après l’induction du diabète, les animaux retiraient leur queue 2 à 3 s plus tôt que les animaux non diabétiques en réponse au stimulus thermique nocif. Comme mentionné précédemment, l’incidence de l’hyperalgésie est due au développement de la neuropathie diabétique. La présente étude a montré que l’extrait d’Ach pouvait améliorer le seuil de nociception chez les rats diabétiques. Les observations concordent avec des études antérieures concernant l’incidence de l’hyperalgésie comme l’un des principaux signes du développement de la neuropathie diabétique. De nombreux mécanismes neuroanatomiques, neurophysiologiques et neurochimiques sont impliqués dans le développement de la douleur neuropathique. La douleur neuropathique survient soit spontanément, soit à la suite d’un stimulus légèrement douloureux, et provoque des symptômes douloureux. Les résultats ont également montré que le diabète augmente les niveaux de MDA et diminue les activités des enzymes antioxydantes GPx et SOD dans le tissu nerveux de la moelle épinière. Les observations ont indiqué un stress oxydatif induit par le diabète dans le tissu nerveux de la moelle épinière. Il a été montré que la production d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) et le stress oxydatif augmentent dans l’hyperglycémie et les conditions diabétiques. À cet égard, il a été constaté que le stress oxydatif est l’une des principales causes de mort neuronale et de développement d’états pathologiques pouvant conduire à l’incidence de la douleur dans les fibres nerveuses périphériques et centrales. La présente étude a indiqué que l’extrait d’Ach était capable de réduire le stress oxydatif en réduisant les niveaux de MDA et en augmentant l’activité des enzymes GPx et SOD. Conformément à la présente étude, Chou et al. ont montré que l’huile d’Ach augmente l’activité des enzymes antioxydantes SOD, GPx et catalase dans des cellules macrophagiques en culture. Comme mentionné ci-dessus, l’apigénine et la lutéoline sont les principaux composés phénoliques trouvés dans l’extrait d’Ach. Il a été démontré que l’administration d’apigénine réduit le stress oxydatif dans divers tissus ou cellules en situation de stress oxydatif. Il a également été montré que l’administration de lutéoline diminue les niveaux de stress oxydatif en diminuant les niveaux de MDA et en renforçant l’activité de la SOD dans le tissu rénal de rats diabétiques. De nombreuses études ont montré que la survenue de l’apoptose dans les tissus nerveux peut provoquer une hyperalgésie dans les conditions de neuropathie diabétique. Les résultats de l’étude actuelle ont montré que l’expression des protéines anti-apoptotiques comprenant Bax, Bcl2, caspase 3 clivée et cytochrome-c était élevée dans le tissu de la moelle épinière lombaire des rats diabétiques. D’autre part, l’expression de la protéine anti-apoptotique Bcl2 a diminué dans le tissu de la moelle épinière lombaire des animaux diabétiques. Les présentes observations ont également montré que le traitement des animaux diabétiques par l’extrait d’Ach pouvait améliorer les paramètres apoptotiques en les rapprochant de la normale et ainsi prévenir les effets cytotoxiques de l’hyperglycémie dans le tissu de la moelle épinière lombaire. Nos études précédentes ont également montré la surexpression de la caspase-3 clivée, du rapport Bax/Bcl2 et du cytochrome-c comme protéines pro-apoptotiques. À cet égard, il a été observé qu’une expression accrue de Bax provoque une augmentation rapide du calcium mitochondrial, qui peut conduire à l’apoptose cellulaire. D’autre part, lorsque la surexpression de Bax est inhibée, l’apoptose due à l’absorption excessive de calcium par les mitochondries est également empêchée. Bien que la signalisation calcique puisse stimuler la production d’ATP par l’activation des déshydrogénases sensibles au calcium dans les mitochondries, l’accumulation d’ions calcium intramitochondriaux peut augmenter la production de ROS. La production excessive de ROS dans les mitochondries peut libérer des stimulants induisant l’apoptose (tels que Bax, cytochrome-c et les protéines caspases) depuis l’espace intermembranaire des mitochondries vers le cytoplasme et ainsi provoquer la mort cellulaire programmée. Une autre complication du diabète impliquée dans le développement de l’hyperalgésie est l’inflammation dans les tissus nerveux. Des observations antérieures ont indiqué qu’une augmentation de la glycémie, en élevant certaines protéines médiatrices de l’inflammation, telles que TNF-α et NF-κB, peut conduire à la neuropathie diabétique. Les résultats actuels ont révélé que le niveau d’expression des protéines inflammatoires NF-κB et TNF-α diminuait dans la situation de neuropathie diabétique. Par conséquent, il peut être suggéré que l’extrait d’Ach peut réduire les paramètres inflammatoires dans le tissu de la moelle épinière lombaire. Il a été montré que l’administration d’apigénine à des souris diabétiques réduit les facteurs inflammatoires (TNF-α, interleukine 6 (IL-6) et NF-κB) et apoptotiques (Bcl-2, Bax et caspase-3) dans le tissu rénal. Une étude a démontré que la lutéoline peut améliorer la cardiomyopathie diabétique via la diminution de l’expression de NF-κB (comme cytokine pro-inflammatoire) chez des souris diabétiques. De plus, l’étude de Chou a montré que l’huile d’Ach réduit la production de facteurs inflammatoires tels que IL-6 et TNF-α dans des cellules macrophagiques en culture. Zolghadri et al. ont également démontré que l’administration de l’extrait d’Ach pouvait réduire l’expression génique de l’IL-1β et de l’oxyde nitrique synthase inductible, comme facteurs inflammatoires et de stress oxydatif, dans le tissu pancréatique, ainsi qu’augmenter la concentration d’insuline et diminuer la glycémie sérique chez des rats diabétiques.
Conclusion
La présente étude a indiqué que l’extrait d’Ach pouvait exercer des effets analgésiques et neuroprotecteurs contre la neuropathie diabétique chez le rat. Les mécanismes moléculaires sous-jacents aux effets protecteurs de l’extrait d’Ach, au moins en partie, peuvent être liés à l’inhibition de l’apoptose, du stress oxydatif et de l’inflammation dans le tissu nerveux de la moelle épinière lombaire des rats diabétiques.
Déclaration de conflits d’intérêts
Tous les auteurs ont déclaré n’avoir aucun conflit d’intérêts dans cette étude.
Contributions des auteurs
A. Kaeidi et A. Shamsizadeh ont conçu et élaboré l’étude ; A. Kaeidi et J. Hassanshahi ont analysé les données ; A. Kaeidi, M.R. Rahmani et J. Hassanshahi ont conduit les expériences et rédigé l’étude ; M. Moradi, A. Kaeidi, M.R Rahmani et J. Hassanshahi ont réalisé des expériences supplémentaires et contribué à fournir l’article révisé. M. Moradi et M.R Rahmani ont contribué de manière égale au projet. La version finale du manuscrit a été approuvée par tous les auteurs. Toutes les données ont été générées en interne, et aucune usine à articles n’a été utilisée. Tous les auteurs acceptent d’être responsables de tous les aspects du travail, en assurant l’intégrité et l’exactitude.